Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− )
Antecedentes: Parasitas Leishmania donovani vivos atenuados como LdCen-/- demonstraram conferir proteção imunidade contra a infecção por Leishmania em ratos, hamsters e cães. Forte imunogenicidade em cães vacinados com LdCen-/- foi relatado anteriormente, incluindo aumento da resposta de anticorpos...
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| Tipo de documento: | artigo |
| Estado: | Versão publicada |
| Data de publicação: | 2016 |
| País: | Brasil |
| Recursos: | Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) |
| Repositório: | Repositório Institucional da UFMG |
| Idioma: | inglês |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.ufmg.br:1843/71559 |
| Acesso em linha: | https://doi.org/10.1186/s13071-016-1528-z http://hdl.handle.net/1843/71559 |
| Access Level: | Acceso aberto |
| Palavra-chave: | Vaccine In Vitro Techniques CD8-Positive T-Lymphocytes CD4-Positive T-Lymphocytes Canine Leishmaniasis Vacina Técnicas In Vitro Linfócitos T CD8-Positivos Linfócitos T CD4-Positivos Cães Leishmaniose Visceral |
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Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− ) Aplicação de co-cultura in vitro rápida sistema de macrófagos e subconjuntos de células T para avaliar a imunogenicidade de cães vacinado com Leishmania viva atenuada donovani centrin deletou parasitas (LdCen −/− ) |
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Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− ) |
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Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− ) Kelvinson Fernandes Viana Vaccine In Vitro Techniques CD8-Positive T-Lymphocytes CD4-Positive T-Lymphocytes Canine Leishmaniasis Vacina Técnicas In Vitro Linfócitos T CD8-Positivos Linfócitos T CD4-Positivos Cães Leishmaniose Visceral |
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Kelvinson Fernandes Viana Jacqueline Araújo Fiuza Sreenivas Gannavaram Ranadhir Dey Angamuthu Selvapandiyan Daniella Castanheira Bartholomeu Denise da Silveira-Lemos Lilian Lacerda Bueno Walderez Ornelas Dutra Ricardo Toshio Fujiwara Hira L. Nakhasi Rodolfo Cordeiro Giunchetti |
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Antecedentes: Parasitas Leishmania donovani vivos atenuados como LdCen-/- demonstraram conferir proteção imunidade contra a infecção por Leishmania em ratos, hamsters e cães. Forte imunogenicidade em cães vacinados com LdCen-/- foi relatado anteriormente, incluindo aumento da resposta de anticorpos favorecendo a resposta Th1 respostas linfoproliferativas, ativação de células T CD4+ e CD8+, aumento dos níveis de Th1 e redução de Th2 citocinas, além de uma redução significativa na carga parasitária após 18 e 24 meses após o parasita virulento desafio. Métodos: Visa validar um novo método utilizando sistemas de cocultura in vitro com macrófagos e CD4+ purificados ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® para avaliar a capacidade microbicida de macrófagos e o perfil de resposta imune como a produção de citocinas IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4 e IL-10. Resultados e discussão: Nossos dados mostraram coculturas de macrófagos e células T purificadas de cães imunizados com LdCen−/− e desafiados com L. infantum foram capazes de identificar alta atividade microbicida, especialmente na cocultura utilizando células T CD4+, em comparação ao grupo Leishmune®. Da mesma forma, co-culturas com células T CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ em ambos os grupos experimentais foram capazes de detectar uma redução na carga parasitária em macrófagos infectados por L. infantum. Além disso, coculturas usando CD4+ ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® foi capaz de identificar níveis mais elevados de citocinas IFN-γ e IL-12, níveis reduzidos de IL-4 e IL-10 e maior Razão IFN-γ/IL-10. Embora os níveis mais elevados de IFN-γ e a relação IFN-γ/IL-10 tenham sido as marcas registradas do grupo LdCen-/- na cocultura usando células T CD4+, resultando em forte redução do parasitismo, a imunização Leishmune® apresentou um produção diferencial de TNF-α na cocultura usando CD4+ :Células T CD8+. Conclusão: As distintas condições dos sistemas de co-cultivo foram validadas e capazes de detectar a indução de proteção. O método descrito neste estudo aplicou uma abordagem nova e mais precisa e foi capaz de produzir resultados laboratoriais parâmetros úteis para testar e monitorar a imunogenicidade e eficácia das vacinas contra Leishmania em cães. |
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Forte imunogenicidade em cães vacinados com LdCen-/- foi relatado anteriormente, incluindo aumento da resposta de anticorpos favorecendo a resposta Th1 respostas linfoproliferativas, ativação de células T CD4+ e CD8+, aumento dos níveis de Th1 e redução de Th2 citocinas, além de uma redução significativa na carga parasitária após 18 e 24 meses após o parasita virulento desafio. Métodos: Visa validar um novo método utilizando sistemas de cocultura in vitro com macrófagos e CD4+ purificados ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® para avaliar a capacidade microbicida de macrófagos e o perfil de resposta imune como a produção de citocinas IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4 e IL-10. Resultados e discussão: Nossos dados mostraram coculturas de macrófagos e células T purificadas de cães imunizados com LdCen−/− e desafiados com L. infantum foram capazes de identificar alta atividade microbicida, especialmente na cocultura utilizando células T CD4+, em comparação ao grupo Leishmune®. Da mesma forma, co-culturas com células T CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ em ambos os grupos experimentais foram capazes de detectar uma redução na carga parasitária em macrófagos infectados por L. infantum. Além disso, coculturas usando CD4+ ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® foi capaz de identificar níveis mais elevados de citocinas IFN-γ e IL-12, níveis reduzidos de IL-4 e IL-10 e maior Razão IFN-γ/IL-10. Embora os níveis mais elevados de IFN-γ e a relação IFN-γ/IL-10 tenham sido as marcas registradas do grupo LdCen-/- na cocultura usando células T CD4+, resultando em forte redução do parasitismo, a imunização Leishmune® apresentou um produção diferencial de TNF-α na cocultura usando CD4+ :Células T CD8+. Conclusão: As distintas condições dos sistemas de co-cultivo foram validadas e capazes de detectar a indução de proteção. O método descrito neste estudo aplicou uma abordagem nova e mais precisa e foi capaz de produzir resultados laboratoriais parâmetros úteis para testar e monitorar a imunogenicidade e eficácia das vacinas contra Leishmania em cães.Background: Live attenuated Leishmania donovani parasites as LdCen−/− were shown to confer protective immunity against Leishmania infection in mice, hamsters, and dogs. Strong immunogenicity in dogs vaccinated with LdCen−/− has been previously reported, including increased antibody response favoring Th1 response lymphoproliferative responses, CD4+ and CD8+ T-cells activation, increased levels of Th1 and reduction of Th2 cytokines, in addition to a significant reduction in parasite burden after 18 and 24 months post virulent parasite challenge. Methods: Aimed at validating a new method using in vitro co-culture systems with macrophages and purified CD4+ or CD8+ or CD4+ :CD8+ T-cells of immunized dogs with both LdCen−/− and Leishmune® to assess microbicide capacity of macrophages and the immune response profile as the production of IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4 and IL-10 cytokines. Results and discussion: Our data showed co-cultures of macrophages and purified T-cells from dogs immunized with LdCen−/− and challenged with L. infantum were able to identify high microbicidal activity, especially in the co-culture using CD4+ T-cells, as compared to the Leishmune® group. Similarly, co-cultures with CD8+ T-cells or CD4+ :CD8+ T-cells in both experimental groups were able to detect a reduction in the parasite burden in L. infantum infected macrophages. Moreover, co-cultures using CD4+ or CD8+ or CD4+ :CD8+ T-cells from immunized dogs with both LdCen−/− and Leishmune® were able to identify higher levels of IFN-γ and IL-12 cytokines, reduced levels of IL-4 and IL-10, and a higher IFN-γ/IL-10 ratio. While the highest IFN-γ levels and IFN-γ/IL-10 ratio were the hallmarks of LdCen−/− group in the coculture using CD4+ T-cells, resulting in strong reduction of parasitism, the Leishmune® immunization presented a differential production of TNF-α in the co-culture using CD4+ :CD8+ T-cells. Conclusion: The distinct conditions of co-culture systems were validated and able to detect the induction of immune protection. The method described in this study applied a new, more accurate approach and was able to yield laboratory parameters useful to test and monitor the immunogenicity and efficacy of Leishmania vaccines in dogs.Universidade Federal de Minas GeraisBrasilICB - DEPARTAMENTO DE MORFOLOGIAICB - DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGIAUFMG2024-07-25T20:07:49Z2024-07-25T20:07:49Z2016info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articlepdfapplication/pdfhttps://doi.org/10.1186/s13071-016-1528-z17563305http://hdl.handle.net/1843/71559engParasites & Vectorsinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGKelvinson Fernandes VianaJacqueline Araújo FiuzaSreenivas GannavaramRanadhir DeyAngamuthu SelvapandiyanDaniella Castanheira BartholomeuDenise da Silveira-LemosLilian Lacerda BuenoWalderez Ornelas DutraRicardo Toshio FujiwaraHira L. NakhasiRodolfo Cordeiro Giunchetti2024-07-25T20:07:50Zoai:repositorio.ufmg.br:1843/71559Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oairepositorio@ufmg.bropendoar:2024-07-25T20:07:50Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
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