Application of rapid in vitro co-culture system of macrophages and T-cell subsets to assess the immunogenicity of dogs vaccinated with live attenuated Leishmania donovani centrin deleted parasites (LdCen −/− )
Antecedentes: Parasitas Leishmania donovani vivos atenuados como LdCen-/- demonstraram conferir proteção imunidade contra a infecção por Leishmania em ratos, hamsters e cães. Forte imunogenicidade em cães vacinados com LdCen-/- foi relatado anteriormente, incluindo aumento da resposta de anticorpos...
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| Tipo de recurso: | artículo |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2016 |
| País: | Brasil |
| Institución: | Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) |
| Repositorio: | Repositório Institucional da UFMG |
| Idioma: | inglés |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.ufmg.br:1843/71559 |
| Acceso en línea: | https://doi.org/10.1186/s13071-016-1528-z http://hdl.handle.net/1843/71559 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Vaccine In Vitro Techniques CD8-Positive T-Lymphocytes CD4-Positive T-Lymphocytes Canine Leishmaniasis Vacina Técnicas In Vitro Linfócitos T CD8-Positivos Linfócitos T CD4-Positivos Cães Leishmaniose Visceral |
| Sumario: | Antecedentes: Parasitas Leishmania donovani vivos atenuados como LdCen-/- demonstraram conferir proteção imunidade contra a infecção por Leishmania em ratos, hamsters e cães. Forte imunogenicidade em cães vacinados com LdCen-/- foi relatado anteriormente, incluindo aumento da resposta de anticorpos favorecendo a resposta Th1 respostas linfoproliferativas, ativação de células T CD4+ e CD8+, aumento dos níveis de Th1 e redução de Th2 citocinas, além de uma redução significativa na carga parasitária após 18 e 24 meses após o parasita virulento desafio. Métodos: Visa validar um novo método utilizando sistemas de cocultura in vitro com macrófagos e CD4+ purificados ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® para avaliar a capacidade microbicida de macrófagos e o perfil de resposta imune como a produção de citocinas IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL-4 e IL-10. Resultados e discussão: Nossos dados mostraram coculturas de macrófagos e células T purificadas de cães imunizados com LdCen−/− e desafiados com L. infantum foram capazes de identificar alta atividade microbicida, especialmente na cocultura utilizando células T CD4+, em comparação ao grupo Leishmune®. Da mesma forma, co-culturas com células T CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ em ambos os grupos experimentais foram capazes de detectar uma redução na carga parasitária em macrófagos infectados por L. infantum. Além disso, coculturas usando CD4+ ou CD8+ ou CD4+ :Células T CD8+ de cães imunizados com LdCen−/− e Leishmune® foi capaz de identificar níveis mais elevados de citocinas IFN-γ e IL-12, níveis reduzidos de IL-4 e IL-10 e maior Razão IFN-γ/IL-10. Embora os níveis mais elevados de IFN-γ e a relação IFN-γ/IL-10 tenham sido as marcas registradas do grupo LdCen-/- na cocultura usando células T CD4+, resultando em forte redução do parasitismo, a imunização Leishmune® apresentou um produção diferencial de TNF-α na cocultura usando CD4+ :Células T CD8+. Conclusão: As distintas condições dos sistemas de co-cultivo foram validadas e capazes de detectar a indução de proteção. O método descrito neste estudo aplicou uma abordagem nova e mais precisa e foi capaz de produzir resultados laboratoriais parâmetros úteis para testar e monitorar a imunogenicidade e eficácia das vacinas contra Leishmania em cães. |
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