Aislamiento de polifenol oxidasa para la melanización de polifenoles extraíbles y no extraíbles de Amaranthus hypochondriacus L. y Pleurotus ostreatus
Todo esto se realizó para la optimización de las condiciones para tener una mayor concentración de polifenoles liberados y listos para ser utilizados como sustrato de los extractos crudos ya obtenidos anteriormente. Todo esto fue analizado por el método de superficie de respuesta teniendo como varia...
| Author: | |
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| Format: | master thesis |
| Status: | Published version |
| Publication Date: | 2020 |
| Country: | México |
| Institution: | Universidad Autónoma Metropolitana |
| Repository: | Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa |
| Language: | Spanish |
| OAI Identifier: | oai:bindani.izt.uam.mx:k643b1275 |
| Online Access: | https://doi.org/10.24275/uami.k643b1275 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | info:eu-repo/classification/LEM/Pleourotus ostreatus info:eu-repo/classification/LEM/Amarantos info:eu-repo/classification/LEM/Hongo ostra info:eu-repo/classification/LEM/Biotechnology info:eu-repo/classification/LEM/Amaranthus hypochondriacus info:eu-repo/classification/LEM/Polifenoles info:eu-repo/classification/LEM/Biotecnología info:eu-repo/classification/LEM/Polyphenols info:eu-repo/classification/LEM/Fungi info:eu-repo/classification/LEM/Amaranths info:eu-repo/classification/cti/6 |
| Summary: | Todo esto se realizó para la optimización de las condiciones para tener una mayor concentración de polifenoles liberados y listos para ser utilizados como sustrato de los extractos crudos ya obtenidos anteriormente. Todo esto fue analizado por el método de superficie de respuesta teniendo como variables explicativas la temperatura de reacción, el tiempo de reacción y la concentración de disolvente o ácido, según la metodología empleada. La variable respuesta en todos los casos fue la concentración de polifenoles por cada gramo de muestra. Para este análisis, a diferencia del experimento anterior, fueron harina de rastrojo de amaranto y de hongo deshidratado con el tamaño de partícula lo más uniforme posible. Para la harina hecha con el rastrojo de amaranto se obtuvieron 19.95 ± 0.922 mg de ácido gálico/g de muestra de polifenoles extraíbles polares con 55% ± 1% v/v de metanol, 36° ± 1.8 °C de temperatura de reacción y a los 42.9 ± 0.9 min. Para los polifenoles con polaridad intermedia se tuvo un valor máximo de 8.838 ± 0.422 mg de ácido gálico/g de muestra con 37.56% ± 2.1% v/v de acetona, 20° ± 0.96°C a 41.5 ± 0.987 min. Para los polifenoles no extraíbles el valor máximo obtenido fue de 102.084 ± 2.453 mg de ácido gálico/g de muestra con una solución de 5% ± 0.04% v/v de ácido sulfúrico, 90° ± 1.37°C y a 103.437 ± 2.13 min. Para la harina hecha con P. ostreatus deshidratado su contenido de polifenoles extraíbles polares alcanzo un valor de 1.695 ± 0.043 mg de ácido gálico/g de muestra con 90% ± 3% v/v de metanol, 50° ± 1.2°C a 20.9 ± 1.01 min. Para los polifenoles con polaridad intermedia se obtuvieron 1.006 ± 0.013 mg de ácido gálico/g de muestra con 8.76% ± 0.07% v/v de acetona, 18° ± 1.67 °C a 36.16 ± 1.6 min. Finalmente, para los polifenoles no extraíbles se alcanzó la concentración de 6.823 ± 0.467 mg de ácido gálico con 8.03% ± 0.01% v/v de ácido sulfúrico, 90° ± 2.57 °C y a los 97 ± 2.21 min. Todos los modelos fueron significativos con un valor P menor a 0.05 teniendo significancia todos los factores. La síntesis de melanina utilizando los polifenoles extraídos y liberados de las matrices alimentarias no se pudo llevar a cabo por que no se tuvo accesibilidad a la planta piloto debido a la pandemia por el Sars cov 2 en el año en curso; sin embargo durante las mediciones de la actividad enzimática de los extractos crudos con actividad polifenol oxidasa se sintetizaron compuestos de color oscuro, dependiendo del polifenol utilizado como sustrato la síntesis de pigmentos oscuros tomó un tiempo mayor o menor. En el caso de la tirosina, en un vaso destapado, ya se presentaba una coloración oscura a los 3 días, mientras que con el catecol tardó entre 4 o 5 días, y con la rutina tomó semana y media, la aparición de dicha coloración. A estos pigmentos oscuros de les realizaron dos pruebas rápidas; la solubilidad en álcali y la precipitación en medio ácido, que cumplieron con los requisitos para determinar que el contenido de los vasos eran melaninas. Esto coincide con los ensayos realizados por Mondal y Murniati en 2018. |
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