Estudio de las roturas de cadena sencilla y de cadena doble en el ADN de espermatozoides microseleccionados y su efecto en ciclos de ICSI

El estudio de la fragmentación del ADN espermático para la evaluación de varones infértiles ha sido de gran interés en los últimos años. Este daño puede ser de cadena sencilla (SSB), mayoritariamente debido a la presencia de estrés oxidativo y relacionado con la capacidad de conseguir un embarazo y...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Lara Cerrillo, Sandra
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2022
País:España
Institución:CBUC, CESCA
Repositorio:TDR. Tesis Doctorales en Red
OAI Identifier:oai:www.tdx.cat:10803/675139
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/10803/675139
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Infertilitat masculina
Infertilidad masculina
Male infertility
Fragmentació de l'ADN espermàtic
Fragmentación del ADN espermático
Sperm DNA fragmentation
ICSI (injecció intracitoplasmàtica d'espermatozoides)
ICSI (inyección intracitoplasmática de espermatozoides)
ICSI (intracytoplasmic sperm injection)
Ciències Experimentals
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Descripción
Sumario:El estudio de la fragmentación del ADN espermático para la evaluación de varones infértiles ha sido de gran interés en los últimos años. Este daño puede ser de cadena sencilla (SSB), mayoritariamente debido a la presencia de estrés oxidativo y relacionado con la capacidad de conseguir un embarazo y la tasa de fecundación; o de cadena doble (DSB), con un origen mayoritariamente enzimático y relacionado con una cinética embrionaria lenta, una menor tasa de implantación y un riesgo elevado de aborto. La fragmentación en el ADN de los espermatozoides se puede estudiar mediante diferentes técnicas como el test Comet (versiones alcalina y neutra), el test de dispersión de la cromatina o el test TUNEL. El primer objetivo de la presente Tesis Doctoral ha sido encontrar una posible explicación a la falta de asociación entre los valores de fragmentación y los resultados reproductivos en tratamientos de Inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI). Para ello, se ha realizado un estudio multimetodológico de la fragmentación con protocolos adaptados para el estudio de espermatozoides microseleccionados bajo criterios de ICSI (ICSI-S). También se han estudiado espermatozoides descartables para ICSI por presentar alteraciones en su movilidad o morfología (ICSI-N). Los resultados muestran la existencia de un sesgo diagnóstico al analizar los valores de SSB y DSB en la muestra de eyaculado en comparación con la subpoblación de espermatozoides candidatos para ICSI. Mientras que los valores de SSB se reducen significativamente en los ICSI-S en comparación con el eyaculado y la muestra tras realizar un Swim-up, los valores de DSB se mantienen en el mismo nivel. Por su parte, los espermatozoides ICSI-N muestran valores incrementados de SSB y DSB, posiblemente relacionado con la presencia de un nivel elevado de estrés oxidativo y de apoptosis abortiva. El segundo objetivo ha sido estudiar el efecto de las roturas de cadena doble en ciclos de ICSI. Se han comparado las tasas de fecundación y euploidía, así como su efecto clínico, tras el uso de un método convencional de preparación seminal (Gradientes de densidad) y tras el uso de un 2 nuevo método de selección microfluídico (dispositivo ZyMōt™ICSI). Previamente, el método convencional ha mostrado una reducción eficiente de los valores de SSB, pero no de DSB. Por el contrario, el dispositivo microfluídico sí ha mostrado resultados prometedores para reducir significativamente los niveles de ambos tipos de roturas. Los resultados muestran que el uso del dispositivo microfluídico permite aumentar la tasa de fecundación en comparación a los Gradientes de densidad, posiblemente debido a la mayor reducción en los valores de SSB. El dispositivo microfluídico también ha permitido aumentar la tasa de euploidía de los embriones obtenidos, especialmente cuando la pareja femenina es menor de 35 años en comparación con el uso del sistema convencional, posiblemente debido a la reducción de los valores de DSB. En cuanto a resultados clínicos, los datos muestran que el uso del dispositivo ZyMōt™ICSI permite obtener mejores tasas de embarazo bioquímico y embarazo clínico y una menor tasa de aborto en comparación con métodos convencionales.

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