Análise ex vivo do potencial antifúngico da molécula plumieridina em Cryptococcus neoformans
Criptococose é uma infecção fúngica invasiva causada pelas espécies patogênicas Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. Esta doença afeta aproximadamente 200.000 indivíduos mundialmente. A alta incidência de mortalidade por meningoencefalite criptococócica associada a problemas de toxicidade,...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2018 |
| País: | Brasil |
| Institución: | Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS) |
| Repositorio: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS |
| Idioma: | portugués |
| OAI Identifier: | oai:www.lume.ufrgs.br:10183/202670 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10183/202670 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Cryptococcus neoformans Cryptococcus gattii Criptococose Virulência |
| Sumario: | Criptococose é uma infecção fúngica invasiva causada pelas espécies patogênicas Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. Esta doença afeta aproximadamente 200.000 indivíduos mundialmente. A alta incidência de mortalidade por meningoencefalite criptococócica associada a problemas de toxicidade, resistência e escassez de terapias antifúngicas torna necessária a pesquisa por novos fármacos. Nosso grupo identificou o potencial terapêutico de um iridóide, plumieridina, isolado do extrato aquoso de sementes de Allamanda polyantha (apocinácea). Sendo assim, o objetivo desse estudo é avaliar as atividades biológicas do composto plumieridina contra C. neoformans. Nós propusemos o uso de um modelo prático para avaliar a eficácia desse composto como tratamento para a criptococcose. Nossa estratégia aborda a infecção de camundongos com uma linhagem fluorescente de C. neoformans, seguida de uma análise de órgãos colonizados baseada na fluorescência. Camundongos foram infectados intranasalmente com linhagens fluorescentes de C. neoformans e tratados com plumieridina ou fluconazol durante 14 dias. Os pulmões e o cérebro foram excisados e examinados no equipamento IVIS LUMINA II, para quantificação da fluorescência e determinação de unidades formadoras de colônia (UFC). A análise por imagem demonstrou uma redução da carga fúngica cerebral e pulmonar de camundongos infectados com C. neoformas. Além disso, para identificar possíveis alvos de plumieridina, estudos in silico foram realizados utilizando o servidor pharmMapper. Entre os alvos preditos, três proteínas envolvidas na via das pirimidinas foram identificadas, timidilato-sintase, orotidine-5’-fosfato-descarboxilase e diidroorotato-desidrogenase. As estruturas de timidilatosintase e orotidina-5’-fosfato-descarboxilase de C. neoformans foram modeladas e submetidas à técnica de docking molecular com a molécula plumieridina, para melhor entender os mecanismos de interação com C. neoformans. Plumieridina interage com os aminoácidos no centro catalítico das enzimas. Além disso, o perfil de expressão de genes de C. neoformans relacionados à via das pirimidinas na presença de plumieridina também foi avaliado por PCR em tempo real (RT-qPCR). Uma diminuição significativa nos níveis de transcrição dos genes da timidilato sintase e da orotidine-5’-fosfato-descarboxilase foi detectada quando as células foram cultivadas na presença de plumieridina. Nossos resultados podem contribuir para descrição e desenvolvimento de novos antifúngicos para o tratamento da criptococose. |
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